PURIFICAZIONE DI ANTICORPI
Sono disponibili molti metodi per la purificazione dei vostri anticorpi monoclonali o policlonali con le nostre attrezzature HPLC/FPLC.
- Purificazione su colonna di affinità coniugata all’antigene
E’ il metodo più efficace per purificare gli anticorpi policlonali anti-peptide. Questo permette di purificarli grazie ad una colonna sulla quale viene immobilizzato un peptide e ottenere così degli anticorpi molto specifici permettendo anche di diminuire la colorazione di fondo. E’ anche possibile fissare una proteina o un misto di proteine su colonna per realizzare lo stesso tipo di purificazione ma i rendimenti sono più variabili e dipendono dalla proteina.
- Purificazione su Proteina G
E’ un metodo molto affidabile e comune per purificare gli anticorpi monoclonali di tutti i tipi. Viene anche utilizzato per la purificazione di anticorpi policlonali. Permette di recuperare oltre il 90% della frazione IgG di un siero, sopranatante di coltura o liquido di asciti
- Purificazione su Proteina A
Questo metodo può essere considerato come equivalente alle colonne di proteina G, permettendo di recuperare circa il 90% della frazione IgG. La scelta tra una purificazione su Proteina A o G dipende molto dall’isotopo dell’anticorpo e/o dalla specie animale.
- Purificazioni specifiche per IgY
Ø Purificazione Livello 1 : Precipitazione con solfato di ammonio Purezza> 96% IgY in confronto alle proteine, ma sussistono alcune sostanze non proteiche. Il rendimento è di 400-1100 mg da IgY da 10 uova immuni, in base alla quantità di tuorlo. E’ un’ottima soluzione paragonabile al siero di coniglio in termini di purezza. Ø Purificazione Livello 2 : Cromatografia Purezza>97% IgY in confronto alle proteine. Per ottenere una purezza maggiore equivalente a una purificazione su proteina A i lipidi vengono eliminati, assieme alla maggior parte delle endotossine, del DNA e delle altre sostanze. Rendimento da 350 a 900mg da IgY.
Prestazioni complementari disponibili :